Գրեթե բոլոր վարակիչ հիվանդությունների լաբորատոր ախտորոշումը հիմնված է հիվանդի արյան մեջ հակամարմինների հայտնաբերման վրա, որոնք արտադրվում են հարուցիչի անտիգենների դեմ՝ շճաբանական ռեակցիաների մեթոդներով։ Նրանք բժշկական պրակտիկա են մտել տասնիններորդ դարի վերջից մինչև քսաներորդ դարի սկիզբը:
Գիտության զարգացումն օգնել է որոշել մանրէների հակագենային կառուցվածքը և դրանց տոքսինների քիմիական բանաձևերը: Սա հնարավորություն տվեց ստեղծել ոչ միայն բուժական, այլև ախտորոշիչ շիճուկներ։ Դրանք ձեռք են բերվում լաբորատոր կենդանիներին թուլացած պաթոգեններ տրամադրելու միջոցով: Մի քանի օր ազդեցությունից հետո նապաստակների կամ մկների արյունը օգտագործվում է մանրէների կամ դրանց տոքսինների հայտնաբերման համար նախատեսված պատրաստուկների պատրաստման համար՝ օգտագործելով շճաբանական թեստեր:
Նման ռեակցիայի արտաքին դրսևորումը կախված է դրա առաջացման պայմաններից և հիվանդի արյան մեջ անտիգենների վիճակից։ Եթե մանրէային մասնիկները անլուծելի են, ապա դրանք նստում են, լուծվում, կապվում կամ անշարժանում են շիճուկում: Եթե անտիգենները լուծելի են, ապա ի հայտ է գալիս չեզոքացման կամ տեղումների երևույթը։
Ագլյուտինացիոն ռեակցիա (RA)
Սերոլոգիական ագլյուտինացիայի թեստը խիստ սպեցիֆիկ է: Դա հեշտ է կատարել և բավականինտեսողական, հիվանդի արյան շիճուկում անտիգենների առկայությունը արագ որոշելու համար: Այն օգտագործվում է Վիդալի ռեակցիայի (տիֆի և պարատիֆային տենդի ախտորոշում) և Վեյգլի (տիֆոիդ տենդ) փորձարկման համար։
Այն հիմնված է մարդու հակամարմինների (կամ ագլյուտինինների) և մանրէաբանական բջիջների (ագլյուտենոգենների) միջև հատուկ փոխազդեցության վրա: Նրանց փոխազդեցությունից հետո առաջանում են մասնիկներ, որոնք նստվածք են ստանում։ Սա դրական նշան է։ Կենդանի կամ սպանված մանրէաբանական նյութերը, սնկերը, նախակենդանիները, արյան բջիջները և սոմատիկ բջիջները կարող են օգտագործվել ռեակցիան կարգավորելու համար:
Քիմիապես ռեակցիան բաժանվում է երկու փուլի՝
- Հակամարմինների (AT) հատուկ կապ անտիգենների հետ (AG).
- Ոչ սպեցիֆիկ - AG-AT կոնգլոմերատների տեղումներ, այսինքն՝ ագլյուտինատի առաջացում։
Անուղղակի ագլյուտինացման ռեակցիա (IPHA)
Այս ռեակցիան ավելի զգայուն է, քան նախորդը։ Այն օգտագործվում է բակտերիաների, ներբջջային մակաբույծների և նախակենդանիների կողմից առաջացած հիվանդությունների ախտորոշման համար։ Այն այնքան սպեցիֆիկ է, որ հակամարմինների նույնիսկ շատ ցածր կոնցենտրացիաներ կարելի է հայտնաբերել։
Մաքուր ոչխարի էրիթրոցիտները և մարդու կարմիր արյան բջիջները նախապես մշակված հակամարմիններով կամ անտիգեններով օգտագործվում են դրա արտադրության համար (կախված նրանից, թե ինչ է ուզում գտնել լաբորանտը): Որոշ դեպքերում մարդու կարմիր արյան բջիջները բուժվում են իմունոգոլոբուլիններով: Էրիտրոցիտների շճաբանական ռեակցիաները համարվում են տեղի ունեցած, եթե դրանք նստել են խողովակի հատակին: Դրական արձագանքի մասինասենք, երբ բջիջները դասավորված են շրջված հովանոցի տեսքով՝ զբաղեցնելով ամբողջ հատակը։ Բացասական ռեակցիան հաշվվում է, եթե էրիթրոցիտները նստել են սյունակում կամ ներքևի մասում գտնվող կոճակի տեսքով:
Տեղումների ռեակցիա (RP)
Այս տեսակի սերոլոգիական ռեակցիաները օգտագործվում են անտիգենների չափազանց փոքր մասնիկները հայտնաբերելու համար: Սրանք կարող են լինել, օրինակ, սպիտակուցներ (կամ դրանց մասեր), սպիտակուցների միացություններ լիպիդներով կամ ածխաջրերով, բակտերիաների մասեր, դրանց տոքսիններ:
Ռեակցիայի համար շիճուկները ստացվում են կենդանիներին, սովորաբար ճագարներին, արհեստականորեն վարակելով: Այս մեթոդով դուք կարող եք ստանալ բացարձակապես ցանկացած շիճուկ: Շճաբանական տեղումների ռեակցիաների դրվածքը գործողության մեխանիզմով նման է ագլյուտինացիոն ռեակցիաներին: Շիճուկում պարունակվող հակամարմինները կոլոիդային լուծույթում միավորվում են անտիգենների հետ՝ ձևավորելով մեծ սպիտակուցային մոլեկուլներ, որոնք նստած են խողովակի հատակին կամ սուբստրատի (գելի) վրա։ Այս մեթոդը համարվում է խիստ սպեցիֆիկ և կարող է հայտնաբերել նյութի նույնիսկ չնչին քանակություն:
Օգտագործվում է ժանտախտի, տուլարեմիայի, սիբիրախտի, մենինգիտի և այլ հիվանդությունների ախտորոշման համար։ Բացի այդ, նա ներգրավված է դատաբժշկական փորձաքննության մեջ։
Գելի տեղումների ռեակցիա
Սերոլոգիական ռեակցիաները կարող են իրականացվել ոչ միայն հեղուկ միջավայրում, այլ նաև ագար գելում։ Սա կոչվում է ցրված տեղումների մեթոդ: Նրա օգնությամբ ուսումնասիրվում է բարդ հակագենային խառնուրդների բաղադրությունը։ Այս մեթոդը հիմնված է անտիգենների հակամարմինների քիմոտաքսիսի վրա և հակառակը: Գելի մեջ նրանք շարժվում ենմիմյանց նկատմամբ տարբեր արագություններով և, հանդիպելով, ձևավորում են տեղումների գծեր։ Յուրաքանչյուր տող AG-AT-ի մեկ հավաքածու է։
Էկզոտոքսինի չեզոքացման ռեակցիա հակատոքսինով (PH)
Հակատոքսիկ շիճուկներն ունակ են չեզոքացնել միկրոօրգանիզմների կողմից արտադրվող էկզոտոքսինի ազդեցությունը: Այս շճաբանական ռեակցիաները հիմնված են դրա վրա: Մանրէաբանությունը օգտագործում է այս մեթոդը շիճուկների, տոքսինների և տոքսոիդների տիտրման և դրանց թերապևտիկ ակտիվությունը որոշելու համար: Տոքսինների չեզոքացման հզորությունը որոշվում է սովորական միավորներով՝ AE։
Բացի այդ, այս ռեակցիայի շնորհիվ հնարավոր է որոշել էկզոտոքսինի տեսակը կամ տեսակը։ Սա օգտագործվում է տետանուսի, դիֆթերիայի, բոտուլիզմի ախտորոշման ժամանակ։ Ուսումնասիրությունը կարող է իրականացվել ինչպես «ապակու վրա», այնպես էլ գելով։
Լիզիսի ռեակցիա (RL)
Իմունային շիճուկը, որը մտնում է հիվանդի օրգանիզմ, բացի պասիվ իմունիտետի հիմնական ֆունկցիայից, ունի նաև լիզող հատկություն։ Այն ի վիճակի է լուծարել մանրէաբանական նյութերը, բջջային օտար տարրերը և վիրուսները, որոնք մտնում են հիվանդի օրգանիզմ: Կախված շիճուկում ընդգրկված հակամարմինների յուրահատկությունից՝ առանձնացվում են բակտերիոլիզիններ, ցիտոլիզիններ, սպիրոխետոլիզիններ, հեմոլիզիններ և այլն։
Այս հատուկ հակամարմինները կոչվում են «կոմպլեմենտ»: Այն հայտնաբերվել է մարդու մարմնի գրեթե բոլոր հեղուկներում, ունի բարդ սպիտակուցային կառուցվածք և չափազանց զգայուն է ջերմաստիճանի բարձրացման, ցնցումների, թթուների և արևի ուղիղ ճառագայթների նկատմամբ: Բայց չորացած վիճակում այն կարողանում է պահպանելդրա լուծողական հատկությունը մինչև վեց ամիս:
Գոյություն ունեն այս տեսակի շճաբանական ռեակցիաների հետևյալ տեսակները՝
- բակտերիոլիզ;
- հեմոլիզ.
Բակտերիոլիզն իրականացվում է հիվանդի արյան շիճուկի և կենդանի միկրոբներով հատուկ իմունային շիճուկի միջոցով: Եթե արյան մեջ առկա է բավարար կոմպլեմենտ, ապա հետազոտողը կտեսնի, որ մանրէները լուծվում են, և ռեակցիան դրական կհամարվի:
Արյան երկրորդ շճաբանական ռեակցիան այն է, որ հիվանդի կարմիր արյան բջիջների կասեցումը մշակվում է հեմոլիզիններ պարունակող շիճուկով, որոնք ակտիվանում են միայն որոշակի հաճոյախոսության առկայության դեպքում: Եթե կա մեկը, ապա լաբորանտը դիտում է կարմիր արյան բջիջների տարրալուծումը։ Այս ռեակցիան լայնորեն կիրառվում է ժամանակակից բժշկության մեջ՝ արյան շիճուկում կոմպլեմենտի տիտրը (այսինքն՝ նրա ամենափոքր քանակությունը, որը հրահրում է էրիթրոցիտների լիզը) որոշելու և կոմպլեմենտի ֆիքսման վերլուծություն կատարելու համար։ Հենց այս կերպ է կատարվում սիֆիլիսի շճաբանական թեստը՝ Վասերմանի ռեակցիան։
Կոմպլեմենտի ամրագրման ռեակցիա (CFR)
Այս ռեակցիան օգտագործվում է հիվանդի արյան շիճուկում վարակիչ նյութի նկատմամբ հակամարմիններ հայտնաբերելու, ինչպես նաև պաթոգենը իր հակագենային կառուցվածքով հայտնաբերելու համար:
Մինչ այս պահը մենք նկարագրել ենք պարզ շճաբանական ռեակցիաներ: RSK-ը համարվում է բարդ ռեակցիա, քանի որ դրանում փոխազդում են ոչ թե երկու, այլ երեք տարրեր՝ հակամարմին, անտիգեն և կոմպլեմենտ։ Դրա էությունը կայանում է նրանում, որ հակամարմինների և հակագենի փոխազդեցությունըառաջանում է միայն կոմպլեմենտի սպիտակուցների առկայության դեպքում, որոնք ներծծվում են ձևավորված AG-AT համալիրի մակերեսին։
Անտիգեններն իրենք, կոմպլեմենտի ավելացումից հետո, ենթարկվում են էական փոփոխությունների, որոնք ցույց են տալիս ռեակցիայի որակը։ Դա կարող է լինել լիզ, հեմոլիզ, անշարժացում, մանրէասպան կամ բակտերիոստատիկ ազդեցություն:
Ռեակցիան ինքնին տեղի է ունենում երկու փուլով.
- Հակագեն-հակամարմին համալիրի ձևավորում, որը տեսողականորեն տեսանելի չէ հետազոտողին:
- Կոմպլեմենտի ազդեցության տակ հակագենի փոփոխություն. Այս փուլը առավել հաճախ կարելի է նկատել անզեն աչքով: Եթե ռեակցիան տեսողականորեն տեսանելի չէ, ապա փոփոխությունները բացահայտելու համար օգտագործվում է լրացուցիչ ցուցիչ համակարգ։
Ցուցանիշ համակարգ
Այս ռեակցիան հիմնված է կոմպլեմենտի ամրագրման վրա: Մաքուր խոյերի էրիթրոցիտները և կոմպլեմենտից զերծ հեմոլիտիկ շիճուկը ավելացվում են փորձանոթին RSC-ի տեղադրումից մեկ ժամ անց: Եթե փորձանոթում մնա չկապված կոմպլեմենտ, ապա այն կմիանա ոչխարի արյան բջիջների և հեմոլիզինի միջև ձևավորված AG-AT համալիրին և կհանգեցնի դրանց լուծարմանը: Սա կնշանակի, որ RSK-ն բացասական է։ Եթե էրիթրոցիտները մնացին անփոփոխ, ապա, համապատասխանաբար, արձագանքը դրական է։
Հեմագլյուտինացիայի թեստ (RGA)
Գոյություն ունեն երկու սկզբունքորեն տարբեր հեմագլյուտինացման ռեակցիաներ: Դրանցից մեկը սերոլոգիական է, այն օգտագործվում է արյան խմբերը որոշելու համար։ Այս դեպքում արյան կարմիր բջիջները փոխազդում են հակամարմինների հետ։
Եվ երկրորդըռեակցիան չի տարածվում սերոլոգիականի վրա, քանի որ արյան կարմիր բջիջները արձագանքում են վիրուսների կողմից արտադրված հեագգլուտինինների հետ: Քանի որ յուրաքանչյուր պաթոգեն գործում է միայն հատուկ էրիթրոցիտների վրա (հավ, գառ, կապիկ), այս ռեակցիան կարելի է համարել խիստ սպեցիֆիկ։
Դուք կարող եք որոշել՝ արձագանքը դրական է, թե բացասական՝ փորձանոթի ներքևում գտնվող արյան բջիջների տեղակայմամբ: Եթե նրանց նախշը հիշեցնում է շրջված հովանոց, ապա հիվանդի արյան մեջ առկա է ցանկալի վիրուսը։ Եվ եթե բոլոր էրիթրոցիտները ձևավորվել են մետաղադրամի սյունակի պես, ապա չկան ցանկալի հարուցիչներ:
Հեմագլյուտինացիայի արգելակման թեստ (HITA)
Սա խիստ սպեցիֆիկ ռեակցիա է, որը թույլ է տալիս որոշել հիվանդի արյան շիճուկում վիրուսների տեսակը, տեսակը կամ հատուկ հակամարմինների առկայությունը:
Դրա էությունը կայանում է նրանում, որ փորձարկման նյութի հետ փորձանոթին ավելացված հակամարմինները կանխում են էրիթրոցիտների վրա անտիգենների նստեցումը, դրանով իսկ դադարեցնելով հեմագլյուտինացումը: Սա որակական նշան է արյան մեջ հատուկ անտիգենների առկայության կոնկրետ որոնվող վիրուսի համար:
Իմունֆլյորեսցենտային ռեակցիա (RIF)
Ռեակցիան հիմնված է AG-AT կոմպլեքսները ֆլյուորեսցենտային մանրադիտակով հայտնաբերելու ունակության վրա՝ ֆտորոքրոմ ներկանյութերով դրանց մշակումից հետո: Այս մեթոդը հեշտ է վարվել, չի պահանջում մաքուր մշակույթի մեկուսացում և քիչ ժամանակ է պահանջում: Այն անփոխարինելի է վարակիչ հիվանդությունների արագ ախտորոշման համար։
Գործնականում այս շճաբանական ռեակցիաները բաժանվում են երկու տեսակի՝ ուղղակի և անուղղակի:
Ուղիղ RIF արտադրվում էհակագեն, որը նախապես մշակվում է լյումինեսցենտային շիճուկով: Իսկ անուղղակին այն է, որ սկզբում դեղը մշակվում է սովորական ախտորոշմամբ, որը պարունակում է հետաքրքրող հակամարմինների անտիգեններ, այնուհետև նորից կիրառվում է AG-AT կոմպլեքսի սպիտակուցներին հատուկ լյումինեսցենտ շիճուկը և մանրէաբանական բջիջները։ դառնալ տեսանելի մանրադիտակի տակ։
