Գունաչափական մեթոդ - վերլուծություն, որը հիմնված է հետազոտված և հայտնի նյութերի գունային հագեցվածության համեմատության վրա: Ֆիզիկական և քիմիական թեստերի արդյունքները մեծ արժեք ունեն գիտության շատ ճյուղերի համար, սակայն ամենից շատ հետազոտություններն օգտագործվում են բժշկության մեջ։
Գունաչափական մեթոդի էությունը
Գոյություն ունեն բազմաթիվ տեսակի թեստեր, որոնք որոշում են նյութերի քիմիական բաղադրությունը: Դրանցից մի քանիսը ունիվերսալ են և լայնորեն կիրառվում են տարբեր ոլորտներում, մյուսները՝ կոնկրետ, ավելի բարձր ճշգրտությամբ։ Գունաչափական մեթոդը ունիվերսալ է։
Վերլուծության էությունը կայանում է նրանում, որ անհայտ կոնցենտրացիայով լուծույթի գունային հագեցվածությունը համեմատվում է ստանդարտ լուծույթի գույնի հետ: Անալիզի ընթացքում հետազոտվող բաղադրիչի որոշակի ռեագենտի հետ փոխազդեցության արդյունքում գոյանում է գունավոր միացություն։ Ռեակցիայի ավարտից հետո ստացված երանգը համեմատվում է լուծույթների գույնի հետ, որոնց կոնցենտրացիան արդեն հայտնի է։
Ենթադրվում է, որ գունամետրիայի հիմնադիրը Ռոբերտ Բոյլն է։ Նա օգտագործում էր սեղմումտանիններ՝ լուծույթում երկաթը պղնձից տարբերելու համար: Հենց Բոյլը նկատեց, որ որքան մեծ է երկաթի կոնցենտրացիան լուծույթում, այնքան ավելի հարուստ է վերջինիս տոնը։
Գունաչափություն
Գունաչափությունը լուծույթներում նյութի քանակի որոշման մեթոդ է։ Վերլուծությունը հիմնված է Բուգեր-Լամբեր-Գարեջրի օրենքի վրա. երբ լույսի ճառագայթը հարվածում է նյութի խիտ ներծծող շերտին, դրա ինտենսիվությունը թուլանում է:
Նյութի կոնցենտրացիան որոշելու գունաչափական մեթոդը կարող է օգտագործել տեսողական համեմատություն կամ համեմատություն՝ օգտագործելով հատուկ գործիքներ՝ գույնի ինտենսիվությունը չափելու համար: Համեմատությունը կատարվում է ուղղակի և փոխհատուցման եղանակով։
- Ուղիղ. Մեթոդը ներառում է փորձարկման լուծույթի գունային մակարդակի համեմատությունը հեղուկի որոշակի խտության և ջերմաստիճանի դեպքում հղման լուծույթի հետ: Ֆոտոկոլորիմետրեր և սպեկտրոֆոտոմետրեր օգտագործելիս թորած ջուրն օգտագործվում է որպես հղման լուծույթ: Սարքերը չափում են հոսանքի ինտենսիվությունը, որը կախված է լույսի ուժգնությունից։
- Փոխհատուցում. Մեթոդը հիմնված է ուսումնասիրված նմուշի գույնը տեղեկանքին հասցնելու վրա: Արդյունքը ձեռք է բերվում լուծիչ ավելացնելով կամ ներկված միջավայրի շերտի բարձրությունը մեծացնելով։
Սպեկտրոֆոտոմետրի, մոնոխրոմատորի և այլ ճշգրիտ գործիքների օգտագործումը ավելի է պարզեցնում հետազոտության առանց այն էլ պարզ մեթոդը և թույլ է տալիս բարձրացնել արդյունքների ճշգրտությունը: Այս սարքերն ի վիճակի են չափել լույսի հաղորդման քանակը և որոշել ալիքի երկարությունը։
Որտեղ է կիրառվում վերլուծությունը
Անալիզի գունաչափական մեթոդն օգտագործվում է այն դեպքում, երբ հայտնի է ճշգրիտ քիմիական բաղադրությունը, կա համեմատության համար տեղեկատու նմուշ, և փորձարկման և հղման նմուշի ջերմաստիճանը նույնն է: Եթե Ձեզ անհրաժեշտ է արագ որոշել գունավոր նյութի քանակը, բայց այն այնքան փոքր է, որ անհնար է կիրառել անալիտիկ մեթոդը։
Գունաչափությունը լայնորեն օգտագործվում է բժշկության մեջ կլինիկական կենսաքիմիական հետազոտությունների և այլ ոլորտներում.
- դեղագործական արդյունաբերություն;
- սննդի և ալկոհոլի արդյունաբերություն;
- ագրոնոմիա (հողի որակի որոշում).
Կողմ և դեմ
Գունաչափական մեթոդը, ինչպես ցանկացած այլ, ունի դրական և բացասական կողմեր:
Առավելությունները ներառում են հետևյալը.
- վերլուծության հեշտություն, նվազագույն նախապատրաստական ընթացակարգեր;
- թեստավորման հնարավորություն նույնիսկ փոքր քանակությամբ թեստային նյութով;
- թանկ սարքավորումների կարիք չկա, թեև վերջերս ավելի ու ավելի շատ են օգտագործվում ոչ էժան ժամանակակից սարքերը։ Բայց դրանք ապահովում են ամենաճշգրիտ արդյունքը։
Թերություններ. վերլուծության ցածր ճշգրտություն՝ համեմատած վերլուծական մեթոդների հետ։
Բիուրետ մեթոդ սպիտակուցի որոշման համար
Սպիտակուցը արյան շիճուկում հոմեոստազի վիճակն արտացոլող ցուցանիշ է: Արյան մեջ մակրոմոլեկուլային միացության կոնցենտրացիայի բարձրացումը կոչվում է հիպերպրոտեինեմիա, ցածր պարունակությունը՝ հիպոպրոտեինեմիա։
Սպիտակուցներարյան շիճուկն ունի այլ բաղադրություն, կառուցվածք, հատկություններ, կատարում է տարբեր գործառույթներ: Դրանք բաժանվում են ֆերմենտների, հորմոնների, իմունոգոլոբուլինների և այլն։ Սպիտակուցների բոլոր խմբերն ունեն մի շարք ընդհանուր բնութագրեր, որոնց հիման վրա մշակվել են կենսաբանական հեղուկներում մակրոմոլեկուլային օրգանական միացությունների որոշման մեթոդներ։
Կլինիկական կենսաքիմիայի բոլոր մեթոդներից առավել հաճախ օգտագործվում են սպիտակուցի որոշման գունաչափական մեթոդները: Դրանք համեմատաբար էժան են, ինչը կարևոր է բյուջետային կազմակերպությունների համար։ և բավականին պարզ են: Ամենատարածվածը բիուրետ մեթոդն է: Մեթոդի էությունը՝ ալկալային միջավայրում սպիտակուցները փոխազդում են պղնձի սուլֆատի հետ և ձևավորում մանուշակագույն միացություններ։ Արյան մեջ սպիտակուցի պարունակությունը որոշվում է ներկման հագեցվածությամբ: Անալիզի համար կենսանյութը վերցվում է առավոտյան դատարկ ստամոքսին։
Անալիզը շատ ճշգրիտ է, սակայն կան գործոններ, որոնք ազդում են արյան մեջ սպիտակուցի կոնցենտրացիայի վրա.
- ֆիզիկական ակտիվություն կենսանյութի նմուշառումից քիչ առաջ;
- հղիության և լակտացիայի վերջին շաբաթները;
- Կորտիկոտրոպին, Միսկլերոն, Կլոֆիբրատ դեղամիջոցների օգտագործումը մեծացնում է արյան մեջ սպիտակուցի պարունակությունը, իսկ Պիրազինամիդի և էստրոգենի օգտագործումը՝ կոնցենտրացիան նվազեցնելու համար;
- ձեռքի սխալ դիրքը կենսանյութի նմուշառման ժամանակ։
Երկաթի որոշում
Արյան մեջ երկաթի քանակը տարբեր հիվանդությունների ախտորոշման հիմնական ցուցանիշներից է։ Նյութը կենտրոնացած է հեմոգլոբինում, որն ապահովում է թթվածնի տեղափոխումը հյուսվածքներ։ ՀամարԵրկաթի որոշումը գունաչափական մեթոդով, առավել հաճախ որպես հիմնական ռեագենտ օգտագործվում է բատոֆենանտրոլինի լուծույթը (0,02%)։ Կենսանյութ - շիճուկ առանց հեմոլիզի հետքերի:
Մեթոդի էությունը՝ երկաթի իոնների և սուլֆատացված բատոֆենանտրոլինի փոխազդեցությունից գոյանում է գունավոր կոմպլեքս, որի հագեցվածությունը որոշվում է ֆոտոմետրիկորեն։ Հստակ լուծում ստանալու համար անհրաժեշտ է պահպանել կենսանյութի նմուշառման կանոնները, սակայն երկաթ-լիգանդ համալիրների օպտիկական խտությունները ճշգրիտ որոշելու համար երկաթը հեմոգլոբինից ազատվում է հիդրօքսիլամինի և լվացող միջոցների (նատրիումի դոդեցիլ սուլֆատ) միջոցով: Թեստի արդյունքը որոշում է պաթոլոգիայի առկայությունը և աստիճանը: Երկաթի նորմալ կոնցենտրացիան պետք է լինի՝
- 14, 2 – 26,0 մկմոլ/լ (տղամարդիկ);
- 10, 6-21, 7 մմոլ/լ (կանայք):
Երկաթի անբավարարությունը սովորաբար կապված է արյան կորստի, սննդակարգի անբավարար ընդունման կամ աղեստամոքսային տրակտից վատ կլանման հետ:
Խոլեստերինի թեստ
Խոլեստերինը օրգանական նյութ է, որը հայտնաբերված է բազմաթիվ օրգանիզմների, այդ թվում՝ մարդկանց բջջային պատում: Այն անհրաժեշտ է խոլեկալցիֆերոլի և ստերոիդ հորմոնների արտադրության համար։ Նորմալ է համարվում 3,37-5,2 մմոլ/լ խոլեստերինի մակարդակը: Բարձր պարունակությունը աթերոսկլերոզի հիմնական պատճառներից մեկն է։
Խոլեստերինի որոշման գունաչափական մեթոդները թույլ են տալիս վաղ փուլում ճանաչել անոթային հիվանդությունները։ Համաձայն իշեմիայի մահացու ելքի ախտաանատոմիական արդյունքների, հիվանդների մոտ լիպոֆիլ ալկոհոլի կոնցենտրացիանեղել է 6,5-7,8 մմոլ/լ։
Գունաչափական մեթոդի սկզբունքն այն է, որ խոլեստերինը օքսիդանում է 3բետա-հիդրօքսի-ստերոիդ օքսիդորեդուկտազի միջոցով՝ ազատելով ջրածնի պերօքսիդ, որը p-aminoatipyrine-ը վերածում է գունավոր միացության: Խոլեստերինի պարունակությունը որոշվում է նրա գույնի հագեցվածությամբ։
Երեխայի մոտ թեստ անցկացնելիս պետք է հաշվի առնել, որ մանկության տարիներին խոլեստերինի կոնցենտրացիան չպետք է գերազանցի 4,1 մմոլ/լ։
Ի՞նչ է ֆերմենտային գունաչափական մեթոդը:
Ֆերմենտային թեստերը հիմնված են բարձր ակտիվություն ունեցող ֆերմենտների ռեակցիաների օգտագործման վրա: Նրանք լայնորեն կիրառվում են անալիտիկ քիմիայում՝ տարբեր նյութեր որոշելու համար՝ նիտրատ իոններից մինչև մակրոմոլեկուլներ։
Ֆերմենտային (ֆերմենտային) մեթոդները սպեցիֆիկ են, որոնք թույլ են տալիս վերլուծել որոշ նյութեր՝ բաղադրությամբ նման այլ նյութերի առկայության դեպքում: Ամենատարածված մեթոդները, որոնք հիմնված են ֆերմենտի օգտագործման վրա `գլյուկոզա օքսիդազ: Թեստն օգտագործվում է արյան մեջ գլյուկոզայի կոնցենտրացիան որոշելու համար։ Թեստի ճշգրտությունը թույլ է տալիս այն օգտագործել 2-րդ տիպի շաքարային դիաբետով հիվանդների մոտ հիպոգլիկեմիկ նյութերի դեղաչափը կարգավորելու համար։
Գլյուկոզա օքսիդանտ մեթոդը համարվում է գլյուկոզայի որոշման լավագույն քանակական մեթոդներից մեկը։ Ե՛վ արյունը (մազանոթը), և՛ շիճուկը կարող են օգտագործվել որպես կենսանյութ, սակայն պլազման ավելի նախընտրելի է, քանի որ այն ունի ավելի ցածր հեմատոկրիտի պարունակություն, ինչը բացասաբար է անդրադառնում արդյունքի ճշգրտության վրա։
Հիմնականում կիրառվում է ֆոտոմետրիայի կինետիկ մեթոդը։ Դրա էությունը կայանում է նրանում, որգլյուկոզա օքսիդազի և պերօքսիդազի հաստատված հարաբերակցությունը, ռեակցիայի մեկնարկից հետո որոշակի ժամանակի ընթացքում գունավոր միացության ձևավորման արագությունը համաչափ կլինի նմուշում գլյուկոզայի մակարդակին: Թեստի հիմնական առավելությունն այն է, որ արդյունքի վրա չի ազդում նմուշում երրորդ կողմի միացությունների առկայությունը: Մեթոդն ունի նաև թերություն՝ թեստի համար պահանջվում են գերմանական կամ շվեդ արտադրողների թանկարժեք չափիչ գործիքներ։
Եզրակացություն
Գունաչափական մեթոդը ճշգրիտ է և հեշտ օգտագործման համար: Բժշկության մեջ դրա օգտագործումը թույլ է տալիս վաղ հայտնաբերել օրգանիզմում տեղի ունեցող տարբեր պաթոլոգիական փոփոխությունները։ Նոր տեխնոլոգիաների ներդրմամբ մեթոդը կատարելագործվում է և ավելի ու ավելի տարածված է դառնում։
