ԱՀԿ վիճակագրության համաձայն՝ վերջին 40 տարիների ընթացքում ՁԻԱՀ-ից մահացել է 25 միլիոն մարդ։ Այս վարակի վնասը հսկայական է։ Պարզվել է, որ վարակվածների մեծ մասը Աֆրիկայում է, որտեղից էլ առաջացել է այս վարակը։ ՄԻԱՎ-ի դեպքում հիվանդության ախտորոշումը հատկապես արդիական է դառնում: Ճիշտ է, ՄԻԱՎ-ի դեմ բուժում դեռևս չկա, բայց վաղ բուժումը կարող է երկարացնել հիվանդի կյանքը և բարելավել դրա որակը։
ՄԻԱՎ վարակի ախտորոշում
ՄԻԱՎ վարակը որոշվում է տարբեր փուլերում հետևյալ մեթոդներով.
- ELISA - enzyme immunoassay.
- Վեսթերն բլոտ.
- PCR - պոլիմերազային շղթայական ռեակցիա:
- արագ թեստեր.
PCR մեթոդը մշակվել է ամերիկացի կենսաքիմիկոս Կարի Մալիսի կողմից, ով դրա համար Նոբելյան մրցանակ է ստացել 1983 թվականին։ Այսօր բժշկության մեջ բոլոր վարակների ախտորոշման այս մեթոդը համարվում է առաջատարը՝ իր ճշգրտությամբ և տեղեկատվական բովանդակությամբ։ ՄԻԱՎ-ը բացառություն չէ այս առումով։
Վերլուծության էությունը
Ցանկացած կենդանի բջիջ պարունակում է ՌՆԹ և ԴՆԹ: Այս նուկլեինաթթուները ունակ են ինքնակրկնօրինակման և ինքնակրկնօրինակման: Յուրաքանչյուր վարակի համար ԴՆԹ-ի բեկորները եզակի են: ATկենսաբանական հեղուկներում նուկլեինաթթուների այս բեկորները շրջանառվում են: Դրանք բռնվում և ճանաչվում են հատուկ տեխնիկայի՝ ռեակտորի միջոցով։ Սա մեթոդի հիմքն է։ Լաբորանտը հաշվում է այս բեկորները։ ՄԻԱՎ-ի ռետրովիրուսը վերահսկվում է ՌՆԹ-ի համար: Նույնիսկ վիրուսային մասնիկների մեկ օրինակով, PCR-ը կարող է հայտնաբերել և հաշվել դրանք:
Երակային արյունը առավել հաճախ օգտագործվում է որպես թեստային հեղուկ: Մեթոդի հատուկ բաղադրիչները կապվում են վիրուսի մասնիկներին և դարձնում դրանք հայտնաբերելի, քանի որ հայտնաբերված բեկորները բազմապատկվում են։
ՄԻԱՎ-ի դեպքում վիրուսի առկայության արդյունքը կարելի է ստանալ կլինիկայի հայտնվելուց շատ առաջ։ Ուստի իր բարձր զգայունության շնորհիվ PCR-ն ունի նման բարձր ախտորոշիչ արժեք։ PCR-ի հսկայական առավելությունը մեթոդի բազմակողմանիությունն է: ՊՇՌ վարակի ինկուբացիոն շրջանը խոչընդոտ չէ։
Հետազոտության արժեքը
PCR մեթոդը բավականին թանկ է: Սա նրա մեծ թերություններից մեկն է։ Այն պահանջում է նորագույն սարքավորումներ և բարձր որակավորում ունեցող լաբորանտ: Հաշվի առնելով վերը նշվածը, փոքր բնակավայրերում ՊՇՌ ախտորոշում չի իրականացվում: Դուք կարող եք թեստավորվել միայն մասնագիտացված խոշոր կլինիկաներում:
Մոսկվայի կլինիկաներում ՄԻԱՎ-ի ԴՆԹ-ի թեստավորման արժեքը սկսվում է 2800 ռուբլուց, վիրուսային ծանրաբեռնվածությունը (վիրուսային ՌՆԹ-ն պլազմայում) որոշվում է PCR-ով՝ սկսած 8800 ռուբլուց, իսկ ՄԻԱՎ-ի դիմադրողականությունը պրոթեզերոնի արգելակիչների նկատմամբ՝ 16500 ռուբլուց: Ինչպես տեսնում եք, գները բավականին բարձր են։ PCR-ը կարող է իրականացվել անվճար հանրային կլինիկաներում MHI քաղաքականության համաձայն: Կարևոր է,որ ընթացակարգը կարող է իրականացվել անանուն: Գրանցամատյանում հիվանդը ստանում է համար, որով կարող է պարզել արդյունքը։ Ժամանակակից բժշկական կենտրոններում կան հաճախորդների անձնական հաշիվներ, որտեղ մուտքագրվելու են այդ տվյալները։
Հետազոտության նպատակներ
ՄԻԱՎ-ի ՊՇՌ ախտորոշումը նշանակվում է նման դեպքերում՝
- Վարակի հայտնաբերում հիվանդ մորից կամ փոխադրողից ծնված երեխայի մոտ՝ ներարգանդային վարակը որոշելու համար։
- Եթե ELISA-ն տվել է կասկածելի արդյունքներ (ՄԻԱՎ-ի PCR-ն այս դեպքում օգնում է վերջնական ախտորոշում կատարել):
- Օրգանիզմում վիրուսի քանակական պարունակությունը հայտնաբերելու համար։
- Դրական իմունոբլոտի դեպքում դրանք լրացնում են միմյանց PCR-ով:
- Թեստավորում դոնորներ.
- ՄԻԱՎ-ի վաղ ախտորոշման համար.
- Արդյունավետությունը և դիմադրողականությունը որոշելու ART-ի նկատմամբ:
Այս վերլուծության առավելությունն այն է, որ ՄԻԱՎ-ի համար PCR կարող է իրականացվել նույնիսկ մինչև մեկ տարեկան երեխաների համար:
Հետազոտությունը հաճախ կատարվում է ոչ թե առաջնային ախտորոշման նպատակով, այլ արդեն բուժման ընթացքում։ Առաջնային ախտորոշումը սերոլոգիական հետազոտություններն են (դրանք որոշում են ՄԻԱՎ-ի դեմ հակամարմինների մակարդակը): Եթե կեղծ դրական արդյունքը կրկնվում է, դա կարող է լինել ցածր վիրուսային բեռով:
PCR-ն ախտորոշում է ՄԻԱՎ-ը, երբ դրա դեմ դեռևս հակամարմիններ չկան: ELISA մեթոդն այս դեպքում պատասխան չի տա։
Իսկ ՄԻԱՎ-ի PCR-ն արդեն դրական կլինի: Բայց ՄԻԱՎ-ի այս շրջանի ախտանիշները ոչ սպեցիֆիկ են: Հիվանդը նախ երկար ժամանակ և անհաջող բուժվում է ARVI-ի համար ընդհանուր պրակտիկանտի կողմից: Պետք է նկատի ունենալ, որ ՄԻԱՎ-ի ախտորոշումը հիմնված է միայնPCR չի դրվում, անհրաժեշտ է անցնել այլ համապարփակ թեստեր։ PCR մեթոդն ավելի հաճախ օժանդակ է բարդ դեպքերի համար։
Պատրաստվում ենք վերլուծության
ՄԻԱՎ-ի դեմ ՊՇՌ-ն ընդունելուց առաջ՝ թեստից 2 օր առաջ, չպետք է ուտել յուղոտ սնունդ, ալկոհոլ: Ավելի լավ է նաև հոգեպես և ֆիզիկապես չլարվել։ Եթե հիվանդին նշանակվում է իմունոստիմուլյացիայի կուրս, ապա այն դադարեցվում է անալիզից 2 շաբաթ առաջ։
Արյունը լավագույնս ընդունվում է առավոտյան: Մարմնի այլ կենսաբանական հեղուկները (սպերմատոզոիդներ, հեշտոցային սեկրեցիա) նույնպես կարող են հետազոտվել, բայց արյունը լավագույն նյութն է։ Թուքը, քրտինքը, մեզը և արցունքները չեն օգտագործվում, քանի որ դրանցում վիրուսի պարունակությունը նվազագույն է։
PCR-ի առավելությունները ՄԻԱՎ-ի համար
Մեթոդի առավելություններն են կեղծ դրական արդյունքի չափազանց ցածր հավանականությունը, ռեակցիայի ունիվերսալությունը մարմնի ցանկացած կենսաբանական հեղուկի նկատմամբ: Վերլուծությունն ունի լայն շրջանակ՝
- Մեկ արյան ընդունումը կարող է օգտագործվել տարբեր վարակների հայտնաբերման համար:
- Տեխնիկան հրատապ է, արդյունքը պատրաստ է հենց հաջորդ օրը.
- Վստահությունը 85-ից 98% է.
- ՄԻԱՎ-ի առկայությունը կարելի է որոշել վարակվելուց 10-14 օր հետո (այս պահին հակամարմիններ չկան):
- Տարիքային սահմանափակում չկա, կարող է իրականացվել անմիջապես ծննդյան պահից։
Մեթոդի դեմ
PCR-ի թերությունները հետևյալն են.
- Վերլուծության արժեքը։
- Պահանջվում է բարդ բժշկական սարքավորումներ։
- Պահանջվում է բարձր որակավորում ունեցող լաբորանտ և բժիշկ,ընդունողի վերլուծություն։
- Արձագանքը շատ զգայուն է, ուստի սխալը կարող է լինել 20%.
- Կարող է հանգեցնել կեղծ դրական արդյունքի, եթե հիվանդը ունի աուտոիմուն պրոցեսներ, ուռուցքաբանություն, քրոնիկական վարակներ։
- Անհրաժեշտ է լաբորատորիայի տարածքի հատուկ մաքրություն, քանի որ վիրուսը կարող է անալիզներ մտնել օդից։ Այդ դեպքում արդյունքը սխալ կլինի։
ՊՇՌ անցկացնող լաբորատորիաների համար, ախտորոշման որակը բարելավելու համար, մշակվել են հատուկ խիստ միջոցառումներ՝ համաձայն SanPiN համակարգի ներքին հսկողության: Բացի այդ, այս տեխնիկայի հետ աշխատելու բոլոր կանոնները պետք է պահպանվեն՝
- Պահանջվում է խստորեն հետևել փորձանոթների վերաբերյալ տեղեկատվությանը:
- Արյան նմուշառումից առաջ նորից նայեք և համոզվեք, որ անալիզը նախատեսված է:
- Բուժքույրը պետք է ճիշտ նշի խողովակները:
- Լաբորանտը պետք է ճիշտ կատարի բոլոր մանիպուլյացիաները կենսանյութի հետ՝ խաչաձև աղտոտումը կանխելու համար:
- Թեստային համակարգը պետք է լինի գերազանց որակի։
Միայն այս բոլոր պայմանների առկայության դեպքում, պատասխանի սխալը կարող է լինել միայն դրվագների մոտ 2%-ը:
Վերլուծության տևողությունը
Շատերին հետաքրքրում է, թե որքան ժամանակ պատրաստ կլինի ՄԻԱՎ-ի համար ՊՇՌ-ն: Ախտորոշումը տևում է ոչ ավելի, քան 8 ժամ: Հիվանդը կարող է պատասխան ստանալ հենց հաջորդ օրը։ Էքսպրես թեստավորումը կատարվում է 2 ժամվա ընթացքում։
PCR հուսալիություն
Չնայած իր բազմաթիվ առավելություններին՝ ՊՇՌ-ն իդեալական ախտորոշման մեթոդ չի համարվում։ Գործով կապվում են նրա հետօրգանիզմում ՄԻԱՎ-ի առկայության սկրինինգային թեստեր ստանալու անհրաժեշտությունը։
Ե՞րբ են արյուն վերցնում անալիզի համար։
Որքա՞ն ժամանակ պետք է ՊՇՌ ընդունել ՄԻԱՎ-ի համար: Հուսալի արդյունք կարելի է ստանալ արդեն ենթադրյալ վարակից 4-4 օր անց արյուն ընդունելիս։ 2 շաբաթ անց ՄԻԱՎ-ի հուսալիությունը կկազմի 98%, իսկ 5 օր ժամկետով` 80%: ՄԻԱՎ-ի ՊՇՌ-ում բացասական արդյունքի առկայությունը վստահելի կլինի, սակայն բացարձակ ճշգրիտ արդյունքի համար կատարվում է նաև ԷԼԻԶԱ։
ELISA անալիզը արդյունավետ կլինի միայն վիրուսի դեմ հակամարմինների առկայության դեպքում, այս ժամանակը կարող է տևել 1-3 ամսից մինչև վեց ամիս: Քանի որ ELISA-ն տալիս է ավելի մեծ հավանականություն (98% -99,9%), PCR-ն չի կարելի անվանել 100% հաստատող թեստ ՄԻԱՎ վարակի առկայության համար: Բայց մյուս կողմից, սա միակ տեխնիկան է, որում պետք չէ սպասել հակամարմինների ի հայտ գալուն։
ՄԻԱՎ-ով ՊՇՌ-ն կարող է տեղեկատվություն տրամադրել ART-ի արդյունավետության, ՄԻԱՎ-ի հիվանդության փուլի և VN-ների քանակի մասին (օրգանիզմում ՄԻԱՎ-ի առկայության քանակական գնահատում): Սա կխոսի փոփոխության ծանրության և չափի մասին:
PCR թեստավորումը ՄԻԱՎ-ի համար նույնպես անհրաժեշտ է, եթե արյան մեջ կան հակամարմիններ, սակայն դրանց առկայությունը չի վկայում ՄԻԱՎ վարակի կլինիկական հուսալիության մասին:
Նրանք փորձարկվում են ոչ միայն վարակի և պատահական սեքսի համար: Այլ առիթներ՝
- Պլանավորում հղիությունը.
- Առաջիկա գործողություն։
- Պատահական սեքս.
- Որոշ մասնագիտություններ պահանջում են այս թեստը աշխատանքի ընդունվելու համար (ուսուցիչներ, բժիշկներ և այլ բժշկական անձնակազմ):
- Բանտարկյալներ.
- տուբերկուլյոզով հիվանդներ.
- Արտակարգ իրավիճակների նախարարության և ոստիկանության աշխատակիցներ.
- Վերադարձել է էկզոտիկ երկրներից արձակուրդից (եթե ուզում եք համոզվել, որ վարակ չկա):
- մարմնավաճառներ.
- Օտարերկրյա ուսանողներ.
- Drugs.
Նաև որոշ ախտանիշներ հիվանդի մոտ կարող են ստիպել ՄԻԱՎ-ի թեստ անցնել.
- Քաշի հանկարծակի կորուստ.
- Փորլուծություն, որը տևում է ավելի քան 3 շաբաթ
- Անհիմն բարձր ջերմաստիճան երկար ժամանակ։
- Այտուցված ավշային հանգույցներ.
- Թոքաբորբի, քենդիդիոզի և այլնի անբացատրելի պատճառ:
Անալիզի վերծանումը ոչ թե լաբորանտի, այլ ներկա բժշկի իրավասությունն է։
PCR կամ ELISA, որն է ավելի լավ:
Երբ ՄԻԱՎ վիրուսի ՌՆԹ-ի ՊՇՌ-ախտորոշումը հայտնաբերվում է և՛ որակապես, և՛ քանակապես: Այս վերլուծությունը հստակորեն բացահայտում է կոնկրետ պաթոգեն, նույնիսկ եթե կան մի քանի խաչաձև արձագանքող պաթոգեններ: Կենսաբանական նյութը կարող է օգտագործվել նույնիսկ չորացրած վիճակում։ Բացասական կողմը PCR-ի բարձր զգայունությունն է, երբ կեղծ դրական արդյունք կարող է տրվել գործիքների կամ փորձանոթի վրա նույնիսկ փոքր քանակությամբ օտար ԴՆԹ-ի առկայությամբ:
ELISA-ի խնդիրն ու հնարավորությունը ռետրովիրուսի նկատմամբ հակամարմինների առկայությունը որոշելն է: Չնայած դրա ճշգրտությունը 99% է, այն կիրառելի չէ վաղ փուլերում։
Որակական ՄԻԱՎ-ի թեստ
ՄԻԱՎ-ի համար բարձրորակ ՊՇՌ որոշում է վիրուսի առկայությունը մարմնում: Արդյունքներն այս դեպքում կունենան այսպիսի տեսք՝ դրական, կեղծ դրական, բացասական։ Բայց այս հետազոտությունը ռետրովիրուսի քանակի մասին տեղեկություն չի տա։ Նման որակական վերլուծությունանտեղի է, երբ ՄԻԱՎ վարակն արդեն իսկ հայտնաբերվել է մարմնում այլ միջոցներով:
Բարձրորակ ՊՇՌ-ով հնարավոր չէ վերահսկել բուժման արդյունավետությունը։
ՄԻԱՎ-ի քանակական
Կատարվում է միայն ՄԻԱՎ-ով վարակված մարդկանց կողմից՝ կենսաբանական արտադրանքում վիրուսի ՌՆԹ-ի կրկնօրինակների թիվը հաշվելու համար:
Նման հետազոտության նպատակն է վերահսկել ընթացիկ բուժումը և բացահայտել վիրուսի դիմադրողականությունը դրա նկատմամբ: Նման հաշվարկներում հակավիրուսային թերապիան բժիշկը կուրորեն չի նշանակում, ուստի այն ավելի արդյունավետ կլինի։ ՄԻԱՎ վարակի քանակական ՊՇՌ-ն շատ ավելի հաճախ է կատարվում: Այս անալիզը ցուցադրվում է որպես արյան պատճեն/մլ:
Ինչ արդյունքներ կարելի է տալ.
- Վիրուսային ՌՆԹ-ն բացակայում է կամ շատ փոքր է (մոտ 20 օրինակ/մլ): Ախտորոշման հստակություն չկա:
- 20-ից 10-ից մինչև 6-րդ աստիճանի պատճեններ / մլ - ախտորոշումը հուսալի է:
- Ավելի քան 106 օրինակ/մլ - բարձր VN.
Լաբորատորիաները կարող են իրական ժամանակում իրականացնել ՄԻԱՎ-ի PCR թեստավորում: Սա ենթադրում է PCR արտադրանքի կուտակման դիտարկում և թվային գնահատում արդյունքների ավտոմատ գրանցմամբ:
