Ի՞նչ է մանրէաբանական հետազոտությունը: Ի՞նչ սխեմայով է այն իրականացվում։ Ի՞նչ է նշանակում անվտանգություն այս դեպքում: Որո՞նք են մանրէաբանական հետազոտության նպատակներն ու փուլերը:
Ընդհանուր տեղեկություններ
Մանրէաբանական հետազոտությունը գիտական գործընթաց է, որի ընթացքում հայտնաբերվում են բակտերիաները և ուսումնասիրվում դրանց հատկությունները՝ մանրէաբանական ախտորոշում կատարելու համար: Այստեղ մեծ նշանակություն ունի ստացված միկրոօրգանիզմի տեսակի կամ տեսակների որոշումը (ենթադրվում է մաքուր կուլտուրա)։ Սա ուղեկցվում է օրգանիզմների կենսաքիմիական և ֆիզիոլոգիական հատկությունների, ինչպես նաև տոքսինների առաջացման հակվածության ուսումնասիրությամբ։ Այդ նպատակների համար օգտագործվում են տեղումների և ագլյուտինացիայի ռեակցիաներ։ Կիրառվում է նաև լաբորատոր կենդանիների վարակումը` հետագայում պաթոլոգիական փոփոխությունների հայտնաբերմամբ:
Աշխատանք թեստային նյութի հետ
Մանրէաբանական ուսումնասիրության ալգորիթմը նախատեսում է հատուկ հրահանգների խստիվ պահպանում: Այսպիսով, փորձարկման նյութը պետք է հավաքվի ստերիլ սպասքի մեջ ասեպտիկ պայմաններում: Անհրաժեշտ է նաև հոգ տանելապահովել հնարավորինս շուտ առաքումը լաբորատորիա: Ցանկալի է նմուշների սառը պահպանում: Մանրէաբանական հետազոտության տեխնիկան ապահովում է բազմաթիվ հնարավոր իրավիճակներ։ Այսպիսով, օբյեկտի տեսակը, միկրոօրգանիզմի հատկությունները և հիվանդության բնույթը հաճախ ստիպում են մշակել աշխատանքի անհատական հրահանգներ: Աշխատանքում օգտագործվում են մեծ թվով տարբեր մեթոդներ. Ամենատարածվածներից մեկը բակտերիոսկոպիան է: Բայց եթե մանրէները ամրագրված չեն, ապա օգտագործվում է մանրացված կամ կախված կաթիլ: Հարկ է նշել, որ վերջին երկու տարբերակները բնութագրվում են վարակիչության բարձր մակարդակով։
Բակտերիոսկոպիա
Այս դեպքում կիրառվում են հարվածներ։ Դրանք ստեղծելու համար հարկավոր է ուսումնասիրվող հեղուկի մի կաթիլ բաժանել ապակե սլայդի մակերեսին: Զեյթսը պետք է չորացնի: Դա հաճախ արվում է՝ դեղը տեղափոխելով գազի այրիչից ստացված բոցի միջով: Չնայած ամրագրող միացությունները կարող են օգտագործվել որպես այլընտրանք: Նշելու համար, որ այս պատրաստուկով նախապատրաստական գործողություններ են իրականացվել, այն ներկվում է։ Նման մանիպուլյացիայի նպատակը ճշգրտությունն է, ինչը շատ կարևոր է մանրադիտակային և մանրէաբանական հետազոտություն իրականացնելիս։ Ի վերջո, եթե դեղը նորից օգտագործեք այլ նպատակով, դուք ստանում եք շիլա, որի հետ արդյունավետ աշխատելը շատ դժվար կլինի։
Ինչու է բակտերիոսկոպիան այդքան տարածված
Այս մեթոդի առկայության պատճառով: Եթե թարմ պատրաստուկի մանրէաբանական ուսումնասիրություն է կատարվում, ապա որոշելու հարուցիչըկարող են օգտագործվել միկրոքիմիական ռեակցիաներ կամ միկրոօրգանիզմի տարբեր կառուցվածքային մասերի ընտրովի ներկում: Ո՞րն է ավելի լավը: Ավելի ճշգրիտ արդյունք կարելի է ստանալ գունավոր պատրաստուկի հետ աշխատելիս։ Այս դեպքում փորձարկման նյութը կիրառվում է նախապես պատրաստված ապակե սլայդի վրա: Եվ անպայման բարակեք (և եթե հնարավոր է նույնիսկ) շերտը: Դրանից հետո դուք պետք է սպասեք, մինչև դեղամիջոցը չորանա օդում: Այնուհետև միկրոօրգանիզմները ամրագրվում են սովորական մեթոդներից մեկի միջոցով: Դրանից հետո սառեցված պատրաստուկը ենթարկվում է ներկման դիֆերենցիալ կամ պարզ ներկով։ Դրա համար կարող են օգտագործվել չոր և բնիկ պատրաստուկներ։ Դրանից հետո մնում է օրգանիզմների կուտակման վայր ուղղել ուլտրամանուշակագույն կամ կարճ կապույտ ճառագայթները, ինչը հանգեցնում է նրան, որ ամբողջ միկրոբը կամ նրա մարմնի որոշակի հատվածները փայլում են։
Բակտերիոսկոպիայի գործնական կիրառում
Օգտագործվում է մի շարք վարակիչ հիվանդությունների ախտորոշման համար։ Դրանցից ամենահայտնին են տուբերկուլյոզը, գոնորեան և կրկնվող տենդը: Բացի այդ, նրանք դիմում են հետազոտությունների, որպեսզի ուսումնասիրեն օրգանի կամ արտադրանքի միկրոֆլորայի ամբողջ համալիրը։ Սակայն քննադատները հաճախ նշում են այս մեթոդի հարաբերական անհուսալիությունն ու անճշտությունը։
Բակտերիաների կուլտուրաների մշակաբույսեր և ենթամշակույթներ
Իրականացրեք դրանք Պաստերի պիպետտի միջոցով: Մանրէաբանական և բջջաբանական հետազոտությունների իրականացումը հաճախ դժվար է իրականացնել առանց պատվաստման և ենթամշակույթի աշխատանքի ընթացքում: Pasteur pipette-ի հետ աշխատելիս նրա ծայրըկոտրել պինցետով: Գործիքը ինքնին այնուհետև տեղափոխվում է այրիչի բոցի միջով, այնուհետև թողնում են սառչի: Ի դեպ, ցանքի համար կարող են օգտագործվել ինչպես հեղուկ, այնպես էլ պինդ սննդային միջավայրեր։ Ընտրության վրա ազդում է մանրէաբանական հետազոտության ինչ նպատակներ: Միաժամանակ անհրաժեշտ է պահպանել աշխատանքի ալգորիթմը և անվտանգության նախազգուշական միջոցները։ Այսպիսով, հեղուկ սնուցող միջավայրի հետ աշխատելիս անհրաժեշտ է ապահովել, որ այն դուրս չթափվի և չթրջի խցանի և փորձանոթների եզրերը։ Երբ ուսումնասիրությունն իրականացվում է պինդ նյութով, մշակույթը ներթափանցելու համար հաճախ օգտագործվում է հատուկ ասեղ։ Երբ ցանք ու ցանքս է կատարվում, դրանք պետք է կատարվեն գազայրիչի բոցի մոտ։ Փորձի մաքրության համար փորձանոթը չպետք է երկար ժամանակ բաց մնա։ Ինչ վերաբերում է մշակույթով գործիքին. պետք է այնպես անել, որ այն որևէ բանի չդիպչի։ Նաև մանրէաբանական հետազոտության տեխնիկան նախատեսում է փորձանոթի ծայրերն այրել մինչև այն փակելը։ Պատրաստի արտադրանքը պետք է ստորագրվի արտադրությունից անմիջապես հետո՝ ապագայում շփոթությունից խուսափելու համար:
Ցանքի արդյունավետություն
Ենթադրվում է, որ այս մեթոդը թույլ է տալիս մանրէաբանական ախտորոշման ժամանակ ավելի ճշգրիտ և հավաստի տվյալներ ստանալ, քան նախկինում դիտարկված բակտերիոսկոպիան: Այս դեպքում գործողությունների ալգորիթմը հետևյալն է՝
- Սկզբում մաքուր մշակույթը քսում են սնուցող միջավայրի մակերեսին, որը լցնում են Պետրի ափսեի մեջ։
- Նախնական ցանքը պետք է կատարվի տեսակի համար բարենպաստ պայմաններումմիկրոօրգանիզմներ.
- Մեկ-երկու օր հետո, օպտիմալ միջավայրի առկայության դեպքում, բոլոր հարմար գաղութները տեղափոխվում են այնտեղ, որտեղ նրանք կարող են առավելագույնս զարգանալ: Սա նրանց ազատում է կողմնակի միկրոֆլորայից:
Վերջնական արդյունքը միատարր բակտերիաների մշակումն է, որը կարելի է նույնականացնել:
Մաքուր մշակույթներ
Բայց ինչպե՞ս են դրանք պատրաստվում: Դրա համար օգտագործվում են կենսաբանական և մեխանիկական մեթոդներ: Առաջին դեպքում մեծ դեր են խաղում սննդանյութերը, որտեղ կան որոշակի մշակույթի զարգացման համար բարենպաստ անհրաժեշտ պայմաններ։ Մոտեցումը կարող է կիրառվել նաև, երբ վարակվում են լաբորատոր կենդանիներ, որոնք ենթակա են որոշակի տեսակի բակտերիաների: Մեխանիկական մեթոդները հիմնված են ստերիլ գործիքի օգտագործման վրա, որով մշակույթը տեղադրվում է սննդարար միջավայրում, որը գտնվում է առաջին, երկրորդ և երրորդ Պետրի ափսեներում: Հետո պետք է սպասել, մինչև աճեն առանձին գաղութներ, և նրանցից արդեն կառանձնանա մաքուր մշակույթը։ Բակտերիաները կարելի է աճեցնել նաև հատուկ թերմոստատներում, որտեղ ջերմաստիճանը պահպանվում է որոշակի մակարդակի վրա (սովորաբար մոտ 37 աստիճան): Այս դեպքում գործընթացը շարունակվում է մոտ մեկ օր։ Բայց, կախված միկրոօրգանիզմների տեսակից, կարող են սահմանվել այլ տերմիններ: Կարևոր է նաև թթվածնի անհրաժեշտ կոնցենտրացիայի առկայությունը։ Դա անելու համար օգտագործեք օդափոխության տարբեր մեթոդներ: Մինչ այժմ մենք խոսում էինք իրավիճակի մասին ընդհանուր առմամբ և ընդհանրապես, բայց այժմ եկեք մեր ուշադրությունը կենտրոնացնենք այն բանի վրա, թե որն է մանրէաբանական հետազոտությունների սխեման։
Պրակտիկա
Հիվանդի կամ պոտենցիալ փոխադրողի մարմնում պաթոգեն միկրոօրգանիզմների հայտնաբերման համար հաճախ օգտագործվում է մի շարք մեթոդներ: Օգտագործվող նյութերն ու մեթոդները կախված են վերլուծության նպատակներից, ինչպես նաև այն միջավայրի պայմաններից, որտեղ իրականացվում է աշխատանքը։ Գործնականում ամենից հաճախ բակտերիաները հայտնաբերվում են մարդուց կամ կենդանուց վերցված արյան կուլտուրաների միջոցով: Եթե տեղային ախտահարումները լավ սահմանված են, ապա խնդրահարույց տարածքներում կարելի է փնտրել պաթոգեններ: Սա բնորոշ է այնպիսի հիվանդությունների, ինչպիսիք են դիզենտերիան, գոնորեան, դիֆթերիան և մի շարք նմանատիպ հիվանդությունները։ Հատկապես ծանր դեպքերում այս գործընթացը բաժանվում է մանրէաբանական հետազոտության առանձին փուլերի (որը բնորոշ է որովայնային տիֆին)։ Նրանցից յուրաքանչյուրն օգտագործում է իր մեթոդները, որոնք ուղղված են վարակի պատճառի հայտնաբերմանը։ Եկեք մանրամասն նայենք որովայնային տիֆի հետ կապված իրավիճակին։ Հիվանդության առաջին շաբաթվա ընթացքում հիվանդության ախտորոշման ամենահուսալի միջոցը արյան կուլտուրաներն են։ Երկրորդի դեպքում սերոլոգիական հետազոտությունը համարվում է այդպիսին. Երրորդ շաբաթում կղանքը հետազոտվում է։ Վերջին մեթոդը համարվում է ապաքինվածների ստուգումը:
Միկրոօրգանիզմի նույնականացում
Սկսվում է այն ներկելու գործընթացից։ Հետո նրանք նայում են, թե ինչպես է բակտերիան կարող քայքայել ածխաջրերը, ամինաթթուները և այլն։ Բացի այդ, այս գործընթացը կարող է համալրվել միկրոօրգանիզմների յուրաքանչյուր առանձին սեռի կամ տեսակի այլ հատկությունների ուսումնասիրությամբ: Որպես օրինակ՝ պետք է բերվեն տարբեր կենդանիների էրիթրոցիտների լուծարման հնարավորությունները, ազդեցությունը արյան պլազմայի կոագուլյացիայի և թրոմբի լուծարման վրա։ֆիբրին և այլն: Այս ամենը միկրոաշխարհի առանձին ներկայացուցիչների դիֆերենցիալ հատկանիշներն են։ Նաև սերոլոգիական նույնականացումը կարող է օգտագործվել վերջնական ճանաչման համար (բայց դա սովորաբար վերաբերում է աղիքային ընտանիքին պատկանող պաթոգեն բակտերիաներին):
Եզրակացություն
Հարկ է նշել, որ մի շարք միկրոօրգանիզմներ հնարավոր չէ նույնականացնել հոդվածում նկարագրված մեթոդներով։ Այս դեպքում լայնորեն կիրառվում է լաբորատոր կենդանիների վարակման պրակտիկան։ Հաշվարկը կատարվում է նրանով, որ կհայտնվի բնորոշ թունավորություն կամ ախտածինություն, որը արհեստական պայմաններում չի նկատվում։ Վարակումը կարող է օգտագործվել նաև որպես ախտածին մանրէների կուտակման մեթոդ։ Եվ արդեն երբ համեմատվում են կենսաբանական, մորֆոլոգիական, շճաբանական և կենսաքիմիական հատկությունների ուսումնասիրման գործընթացում հայտնաբերված ուսումնասիրված մշակույթի բնութագրերը, կարելի է ասել, որ հայտնի է, թե ինչ մանրէների հետ գործ ունենք։ Նույնականացում նշանակում է բակտերիաների սեռի, տեսակի և տեսակի նշում: Եթե ուսումնասիրվող միկրոօրգանիզմը որոշակի հատկություններով շեղվում է իր բնորոշ հատկանիշից, ապա դա պետք է նշվի: Մի շարք փորձագետներ կարծում են, որ նման դեպքերում օգտակար կլինի կիրառվող բոլոր մեթոդների և տեխնիկայի կրկնօրինակումը: Երբեմն հետազոտությունը կարող է տեղափոխվել հաջորդ մակարդակ, որը պահանջում է ավելի լուրջ (և ավելի ծախսատար) մոտեցում: Եթե բացասական արդյունքներ են ստացվել, ապա դա ցույց է տալիս, որ նախապատրաստումըմիկրոօրգանիզմները բացակայում էին կամ դրանք կենսունակ չէին: Բայց հետազոտության ճշգրտության համար, եթե կասկածվում են մի շարք բացիլներ (դիզենտերիա, դիֆթերիա, որովայնային տիֆ), նման դեպքերում ցուցադրվում են կրկնակի ստուգումներ։ Դա անհրաժեշտ է, որպեսզի մասնագետները ճշգրիտ պատկերացում ունենան, թե ինչի հետ պետք է զբաղվեն։
